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產(chǎn)品型號(hào):PC-500, 4X96
產(chǎn)品代碼:
產(chǎn)品價(jià)格:
折 扣 率: 0
最后更新:2017-06-12
關(guān) 注 度:2994
生產(chǎn)企業(yè):深圳市國(guó)泰宜豐科技有限公司
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產(chǎn)品詳細(xì)介紹PSIΨClone PCR 96試劑盒
一種用于純化PCR反應(yīng)擴(kuò)增產(chǎn)物的試劑盒,適用于真空或離心的流程 這種PSIΨClone PCR 96試劑盒以方便的96孔板的形式為研究者提供了一種快速地處理PCR反應(yīng)產(chǎn)物的方法。其流程可分為真空法和離心法。兩種流程都可以快速地獲得高產(chǎn)量、高純度適用于分子生物學(xué)研究的DNA。 PCR反應(yīng)中的DNA片斷(從100bp到10kb),可以與試劑盒中的板上的膜結(jié)合。然后洗去殘余的引物、核苷酸、酶和鹽類。隨后可以用低鹽緩沖液把DNA洗脫下來(lái),DNA的濃度較高可不作任何處理直接應(yīng)用于進(jìn)一步的研究。 PCR擴(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)物中殘余的引物、核苷酸、酶和鹽類會(huì)影響分子研究(如克隆、測(cè)序等)。PSIΨClone PCR 96試劑盒可以以方便的96孔板的形式有效地去除這些殘余的反應(yīng)物。這些純化的擴(kuò)增產(chǎn)物可以直接用于測(cè)序或者亞克隆。 試劑盒的組分及其制備(參見(jiàn)后面的儲(chǔ)存條件) PCR 96 板:可以直接使用。 結(jié)合緩沖液:這種溶液在低于22℃時(shí)會(huì)產(chǎn)生結(jié)晶。如果存在結(jié)晶,則將其加熱至50℃融解。 清洗緩沖液:所提供的清洗緩沖液是高濃度的,使用前需用乙醇將其稀釋至乙醇終濃度為75-80%。具體說(shuō)明請(qǐng)參見(jiàn)介紹流程的章節(jié)。 洗脫緩沖液:可直接使用。 收集板:使用真空法時(shí)所提供的板特異地將孔之間的距離減到了最小(可以用其它的板來(lái)代替)。 PSI Clone PCR 96 DNA純化試劑盒所提供的試劑足以滿足對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)進(jìn)行96次DNA分離的需要。 使用真空叉管處理PCR反應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物 清洗緩沖液的濃溶液 (Buffer #2) 使用之前用乙醇稀釋。 如果是使用PCR 96單板試劑盒(Cat# PC-500),在清洗緩沖液的濃溶液試劑瓶中加入48ml乙醇。如果是使用PCR 96 4板試劑盒(Cat# PC-501),則取出12ml清洗緩沖液濃溶液于一空的試劑瓶中,并且加入48ml乙醇。處理每個(gè)板之前重復(fù)這一步驟。 板上未使用的孔必須用帶子封住,以免在處理過(guò)程中真空泄漏。 操作流程: 1. 向PCR反應(yīng)物中加入1體積的結(jié)合緩沖液(#1)并混合均勻。 2. 將廢棄的托盤(pán)放在真空叉管內(nèi)。 3. 將PCR反應(yīng)物和結(jié)合緩沖液的混合物加至平板上,開(kāi)始抽真空直至所有樣品穿過(guò)膜層。 4. 吸取200ul稀釋的清洗緩沖液于每孔清洗板。抽真空直至所有的液體穿過(guò)膜。 5. 重復(fù)兩次清洗的步驟,總共洗三次。 6. 真空條件下使板空干10分鐘。 7. 把板從真空管套中取出,用紙吸去黏附在板底部的任何過(guò)剩的液體。 8. 將PCR 96板放在真空叉管內(nèi),插入收集板,并且調(diào)節(jié)其高度使得PCR 96板滴下的液體正好落在收集板的孔內(nèi)。 9. 每孔中央加入80ul洗脫緩沖液(#3)。靜止2分鐘。抽真空以收集干凈的PCR產(chǎn)物。如果需要增加產(chǎn)物的濃度,可以將洗脫緩沖液體積減至50ul。 利用離心法處理PCR反應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物 清洗緩沖液的濃溶液 (Buffer #2) 使用之前用乙醇稀釋。 如果是使用PCR 96單板試劑盒 (Cat# PC-500),在清洗緩沖液的濃溶液試劑瓶中加入48ml乙醇。 如果是使用PCR 96 384板試劑盒 (Cat# PC-501) , 則取出12ml清洗緩沖液濃溶液于一空的試劑瓶中,并且加入48ml乙醇。處理每個(gè)板之前重復(fù)這一步驟。 操作流程: 1. 向PCR反應(yīng)物中加入1體積的結(jié)合緩沖液(#1)并混合均勻。 2. 將PCR反應(yīng)物和結(jié)合緩沖液的混合物加至平板上。 3. 將一空的微平板(未提供)放在PCR 96板的下面以收集廢液。用吊桶式轉(zhuǎn)子750g離心2分鐘。如果處 理單個(gè)板時(shí)需要平衡。將廢液板上的廢液倒掉。 4. 吸取200ul稀釋的清洗緩沖液于每孔清洗板。將廢液板放在PCR 96板的下方,750g離心2分鐘,將廢液 倒掉。 5. 再重復(fù)兩次清洗的步驟,總共清洗三次。 6. 750g離心使板空干10分鐘。 7. 吸去黏附在板底部的任何過(guò)剩的液體。 8. 將收集板放在PCR 96板的下方,每孔中央加入80ul洗脫緩沖液(#3)。靜止2分鐘。750g離心3分鐘 收集干凈的PCR產(chǎn)物。如果需要增加產(chǎn)物的濃度,可以將洗脫緩沖液體積減至50ul。 未提供的必需材料: 95%的乙醇或者無(wú)水乙醇 真空設(shè)備或者離心機(jī) 離心法時(shí)所需的收集廢液的板 故障排除: 流程中的清洗步驟操作有誤可能會(huì)導(dǎo)致片斷的回收效率低。 1 檢查清洗緩沖液(#2)中是否加入乙醇。 2 清洗過(guò)程中要注意去除板底部多余的清洗緩沖液的液滴。 3 在加入洗脫緩沖液之前一定要使板完全空干。 各組分的儲(chǔ)存條件: 組分 儲(chǔ)存條件 PCR 96 板 室溫保存,保質(zhì)期 不限 結(jié)合緩沖液(Buffer #1) 22℃以上避光保存,保質(zhì)期見(jiàn)標(biāo)簽說(shuō)明 清洗緩沖液(Buffer #2) 室溫保存,保質(zhì)期見(jiàn)標(biāo)簽說(shuō)明 洗脫緩沖液(Buffer #3) 室溫保存,保質(zhì)期見(jiàn)標(biāo)簽說(shuō)明 收集板 室溫保存,保質(zhì)期不限
訂貨信息: 目錄編號(hào) 產(chǎn)品說(shuō)明 PC-500 PSI Ψ Clone PCR 96 單板試劑盒(板和試劑可用96次) PC-501 PSI Ψ Clone PCR 96 4板試劑盒(板和試劑可用4×96次) PC-502 PSI Ψ Clone PCR 96 4板試劑盒(板和試劑可用50×96次) |
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會(huì)員級(jí)別:免費(fèi)會(huì)員 |
加入時(shí)間:2017-01-11
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